实验小鼠饲养环境建设及鼠房操作管理 CEIDI西递
一、设施环境
温度:小鼠临界温度为低温10℃,高温37℃。最适温度为20~26℃,每日温度不宜波动太大。一般小鼠饲养盒内温度比环境高1~2℃。
湿度:饲养间相对湿度应控制在40%~70%,最适相对湿度为50%~60%。一般小鼠饲养盒内湿度比环境高5%~10%。
空气清新度:通常以氨浓度作为动物饲养间空气清新度的指标,要求氨浓度不超过20ppm。以通风换气来控制饲养间的空气清新,换气次数根据饲养的动物种类和饲养密度进行调整,一般控制在10~20次/h,小鼠饲育笼旁气流速度小于0.2m/s。
光照:小鼠适宜光线暗的环境,强光会对其正常生理活动产生影响,尤其白化小鼠的视网膜在强光下会造成损伤。饲养间的光照强度以15~20lx为宜,明暗交替为12h/12h或10h/14h。
噪声:小鼠喜欢安静的环境,饲养间的噪声应控制在60dB以下。此外,超声波对动物的影响常常比人感受的要大,应避免电器的蜂鸣、笼具与地面摩擦、脚轮的摩擦声等。
笼具:宜用无毒塑料制成的透明或不透明的鼠盒,不锈钢丝编制的笼盖,饮水器为玻璃或塑料瓶,瓶塞上装有可自动吸水的金属或玻璃饮水管。笼架一般可移动,主要采用不锈钢材质。笼具应可经受多种方法消毒灭菌。
层流柜和独立通风笼具(IVC)是常用的小鼠饲养设备,这些设备通过高效过滤器可保持饲养笼盒内空气的净化。
小鼠笼具的内外边角均应圆滑、无锐口,每只小鼠所占笼具的最小面积和笼具高度要达到国家标准的要求。
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二、饲料、饮水和垫料
1.饲料
小鼠饲喂配合饲料,要求必须保持营养物质的平衡稳定,富含蛋白质,否则会影响生长发育、生产繁殖和抵抗疾病的能力(尤其在断奶时仔鼠死亡率高)。按照生长时期的不同,可分为生长料、繁殖料和维持料。成型饲料具一定的硬度,以便小鼠磨牙。为保障实验小鼠的微生物净化,饲料应用前需消毒灭菌。小鼠饲料的消毒灭菌主要有两种方法,一种为预真空高压灭菌,灭菌效果可靠,但是饲料的营养成分会有一定损耗。另一种是用60Co辐射灭菌,这种方法对营养成分的破坏很小,但成本相对较高。
2.饮水
实验小鼠的饮用水必须进行消毒灭菌处理。常用实验动物饮水机对动物饮用水进行过滤和消毒处理,也可用盐酸将水酸化(pH 2.5~3.0),酸化水在一定程度上可抑制细菌生长。也可采用高压锅灭菌,效果更可靠。动物饮用水应定期进行除菌效果监测,监测频率应不低于每月1次。
3.垫料
垫料应选用吸湿性好、尘埃少、无异味、无毒性、无油脂的材料。常用的垫料有刨花、玉米芯、再生纸等。严禁使用针叶木(松、桧、杉)刨花作垫料,这类刨花发出具有芳香味的挥发性物质,影响药理和毒理方面的实验结果。垫料需高压灭菌或60Co辐照灭菌后方可使用。
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三、饲养操作与日常管理
小鼠胃容量小,随时采食,是多餐习性的动物。饲养要求保障动物随时采食,一般每周添料3~4次。在小鼠大群饲养中,每周应固定2天添加饲料,其他时间可根据情况随时注意添加。动物饮水同样保障随时饮用的需求。应用饮水瓶饲喂时,由于会有饲料残渣在小鼠饮水过程中进入水瓶,因此,动物饮水瓶要求每天清洗一次,每周消毒一次。
由于小鼠的饮食和排泄均在笼盒中进行,因此,需要及时更换垫料以保持空气的清新。但是,啮齿类动物自然领地的习性也需要保留一些排泄的余味,垫料的更换也不宜太频繁。一般每周更换2次为宜。换垫料时将饲养盒一起移去,在专门的房间倒垫料,以防止室内的灰尘和污染。
饲养和管理人员必须严格遵守操作规程,并做好工作记录,包括近交谱系图、品系记录、个体记录、繁殖记录、工作日志,以及饲养室温度、湿度等,记录应妥善保存。
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四、废物处理
小鼠生产和实验过程中会产生许多废弃物,包括污水、废弃垫料、一次性口罩、手套、帽子及动物尸体等。必须按照相关要求进行无害化处理,以达到不污染环境的目的。
1.污水的无害化处理
设施排出的污水应首先集中在储水池中进行消毒。消毒方法使用最多的是化学处理。一是向污水中通以氯气(1000~2000mg/L,作用2~6h),或是通以臭氧(100~750mg/L,作用30~90min),或者加热法处理。一般认为,加热法较化学法更为可靠。污水消毒可加热至95℃以上,作用不少于30min,然后才能排入市政下水管道。
2.普通固态废弃物的无害化处理
将污染垫料、一次性口罩、手套、帽子等固态废物由污染通道传至外环境,及时装进垃圾袋中或专用的垫料容器内,注意防蝇、防渗漏,并及时交付有资质的环卫公司进行无害化处理。
3.普通动物尸体、组织和锐器的处理
动物尸体装入专用尸体袋中并存放于冰柜中待统一焚烧。针头、玻璃、手术刀片放入锐器收集箱。一次性使用的注射器、输液管等塑料制品,毁形后按有关要求统一进行无害化处理。
4.特殊(感染及放射性)废弃物的处理
进行感染和放射性实验所产生的废弃物,必须按照国家有关法令进行无害化处理,严禁作为普通废弃物进行一般处理。
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